偶聯(lián)酶促反應(yīng)測定5'-核苷酸酶的方法和試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN200510053207.6 申請日 -
公開(公告)號 CN1693882A 公開(公告)日 2005-11-09
申請公布號 CN1693882A 申請公布日 2005-11-09
分類號 G01N21/78;G01N33/50;C12Q1/34;C12Q1/68;C12Q1/00 分類 測量;測試;
發(fā)明人 蔡楓 申請(專利權(quán))人 浙江亞克藥業(yè)有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 310053浙江省杭州市濱江區(qū)濱康路677號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 Bertrand(1982)借助5’-核苷酸酶將次黃苷酸水解產(chǎn)生次黃苷,通過次黃苷偶聯(lián)嘌呤核苷磷酸化酶和黃嘌呤氧化酶酶促反應(yīng)生成過氧化氫,利用Trinder氏反應(yīng)過氧化氫在過氧化物酶的氧化作用下將供氫體3,5-雙氯-2-羥基苯磺酸和4-氨基比林偶聯(lián)物凝聚成紫紅色的有色醌,通過連續(xù)反應(yīng)和動(dòng)態(tài)觀察有色醌510nm處吸光度上升的速率來測定5’-核苷酸酶的活性。該法缺點(diǎn)是供氫體的選擇過窄。本發(fā)明將苯胺類化合物ADOS、ADPS、ALPS、TODB、TOOS和TOPS用作Trinder氏反應(yīng)的供氫體,增加了反應(yīng)的靈活性。本發(fā)明還涉及用于進(jìn)行上述方法的試劑盒。