一種高效增殖、靶向殺傷腫瘤的CTL制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410192581.3 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN103923880B 公開(kāi)（公告）日 2016-03-30
申請(qǐng)公布號(hào) CN103923880B 申請(qǐng)公布日 2016-03-30
分類號(hào) C12N5/0783(2010.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 魏薇;趙西娟;魏麗婉;孟祥玲 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 四川全組生命科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都行之專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 成都百賽泰科生物科技有限公司;四川全組生命科技有限公司
地址 610000 四川省成都市武侯區(qū)人民南路三段17號(hào)附1號(hào)1棟14層1401號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種高效增殖、靶向殺傷腫瘤的CTL制備方法。所述CTL制備方法，包括以下步驟：（a）免疫磁珠陰性分選去除CD4+CD25+Treg細(xì)胞；（b）將混合細(xì)胞置于裝有無(wú)血清培養(yǎng)基中培養(yǎng)，獲得懸浮細(xì)胞和貼壁細(xì)胞，（c）貼壁細(xì)胞中加入GM-CSF及IL-4，培養(yǎng)5天；第6天，加入腫瘤細(xì)胞全抗原，第7天加入TNF-α和IL-27；（d）將懸浮細(xì)胞移至經(jīng)抗CD3單抗和重組人纖維連接蛋白包被的培養(yǎng)瓶中，加入IFN-γ，第2天加入IL-2、IL-12、IL-27，培養(yǎng)至第8天，得到CIK細(xì)胞；（e）將CIK細(xì)胞與成熟DC細(xì)胞混合，加入IL-12、IL-7、抗CD28單克隆抗體培養(yǎng)；第3天，加入抗CTLA-4單克隆抗體，再培養(yǎng)4天。本發(fā)明所述方法提高體外CTL細(xì)胞增殖的效率及其靶向殺傷腫瘤細(xì)胞的活性，抑制外周血單個(gè)核細(xì)胞向CD4+CD25+Treg細(xì)胞轉(zhuǎn)化。