大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010230993.7 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN111394300B | 公開(kāi)（公告）日 | 2021-11-26 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN111394300B | 申請(qǐng)公布日 | 2021-11-26 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N5/071;C12M3/00;C12M1/36;C12M1/26;C12M1/24;C12M1/12;C12M1/00 | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 曹毓琳;賀偉;滕睿頔;王穎;張嗣良;張立新;白志惠;趙宇紅;楊光;賈福強(qiáng) | 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 | 北京臻溪谷醫(yī)學(xué)研究中心（有限合伙） |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京卓愛(ài)普專(zhuān)利代理事務(wù)所（特殊普通合伙） | 代理人 | 王玉松;宋丹丹 |
| 地址 | 100010 北京市西城區(qū)西什庫(kù)大街31號(hào)院23號(hào)樓2層201 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)方法，該方法包括以下步驟：將3D微膠囊溶脹，3D微膠囊呈蜂巢狀，直徑為0.5?10mm，微囊的孔徑為10nm?10000nm；將單細(xì)胞懸液接種于溶脹后的3D微膠囊，干細(xì)胞的接種密度為1?8×105個(gè)/ml，再用擴(kuò)增培養(yǎng)基對(duì)干細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增培養(yǎng)，培養(yǎng)條件如下：靜態(tài)培養(yǎng)1?3天，靜態(tài)培養(yǎng)時(shí)的攪拌速度調(diào)至50?70RPM、pH調(diào)至7.0、DO50％、溫度為37±1℃，每隔2天補(bǔ)加一次培養(yǎng)基，灌流培養(yǎng)3?5天，灌流培養(yǎng)時(shí)的灌流流速由0.8vvd升至2vvd，調(diào)節(jié)攪拌速度升至100rpm，每隔2天補(bǔ)加一次培養(yǎng)基；用3D微膠囊溶解劑進(jìn)行解囊；收獲擴(kuò)增細(xì)胞；本發(fā)明提供的大規(guī)模干細(xì)胞培養(yǎng)方法能夠解決大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞難以收獲的問(wèn)題，且使用該方法培養(yǎng)的干細(xì)胞增殖效果好、活率高，收獲時(shí)間短。 |
