大規(guī)模干細胞培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010230993.7 申請日 -
公開（公告）號 CN111394300B 公開（公告）日 2021-11-26
申請公布號 CN111394300B 申請公布日 2021-11-26
分類號 C12N5/071;C12M3/00;C12M1/36;C12M1/26;C12M1/24;C12M1/12;C12M1/00 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 曹毓琳;賀偉;滕睿頔;王穎;張嗣良;張立新;白志惠;趙宇紅;楊光;賈福強 申請（專利權）人 北京臻溪谷醫(yī)學研究中心（有限合伙）
代理機構 北京卓愛普專利代理事務所（特殊普通合伙） 代理人 王玉松;宋丹丹
地址 100010 北京市西城區(qū)西什庫大街31號院23號樓2層201
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種大規(guī)模干細胞培養(yǎng)方法，該方法包括以下步驟：將3D微膠囊溶脹，3D微膠囊呈蜂巢狀，直徑為0.5?10mm，微囊的孔徑為10nm?10000nm；將單細胞懸液接種于溶脹后的3D微膠囊，干細胞的接種密度為1?8×105個/ml，再用擴增培養(yǎng)基對干細胞進行擴增培養(yǎng)，培養(yǎng)條件如下：靜態(tài)培養(yǎng)1?3天，靜態(tài)培養(yǎng)時的攪拌速度調至50?70RPM、pH調至7.0、DO50％、溫度為37±1℃，每隔2天補加一次培養(yǎng)基，灌流培養(yǎng)3?5天，灌流培養(yǎng)時的灌流流速由0.8vvd升至2vvd，調節(jié)攪拌速度升至100rpm，每隔2天補加一次培養(yǎng)基；用3D微膠囊溶解劑進行解囊；收獲擴增細胞；本發(fā)明提供的大規(guī)模干細胞培養(yǎng)方法能夠解決大規(guī)模培養(yǎng)時細胞難以收獲的問題，且使用該方法培養(yǎng)的干細胞增殖效果好、活率高，收獲時間短。