一種誘導脂肪干細胞成軟骨分化的培養(yǎng)方法和培養(yǎng)液

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810265912.X 申請日 -
公開（公告）號 CN108410803B 公開（公告）日 2019-02-05
申請公布號 CN108410803B 申請公布日 2019-02-05
分類號 C12N5/077;C12N5/0775 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 田紅青 申請（專利權）人 南京千年健干細胞基因工程有限公司
代理機構(gòu) 深圳市蘭鋒知識產(chǎn)權代理事務所（普通合伙） 代理人 湖南源品細胞生物科技有限公司
地址 410100 湖南省長沙市長沙縣長沙經(jīng)濟技術開發(fā)區(qū)泉塘街道漓湘路98號宿舍樓205
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種誘導脂肪干細胞成軟骨分化的培養(yǎng)方法和培養(yǎng)液，包括如下步驟：(1)取皮下脂肪組織，沖洗、除去脂肪組織膜和血管剪成碎塊，酶消化，加入完全培養(yǎng)基，離心去除脂肪細胞及脂滴，重懸于完全培養(yǎng)基，接種于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)24h后換培養(yǎng)液除去未貼壁細胞，每3天換液，細胞融合后用0.25％胰酶和1mmol/L EDTA 37℃消化3～5min，完全培養(yǎng)基終止消化，1:2比例傳代；(2)傳代細胞接種于含有完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)48h后更換培養(yǎng)基為不完全培養(yǎng)基，加入Sox9基因激活劑繼續(xù)培養(yǎng)，每3d換一次培養(yǎng)基。本發(fā)明提供的方法可以有效誘導脂肪干細胞成軟骨分化，可以以脂肪干細胞為種子細胞制備得到大量軟骨細胞以滿足臨床對軟骨細胞的需求。