一種誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞成軟骨分化的培養(yǎng)方法和培養(yǎng)液

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810265912.X 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN108410803B 公開（公告）日 2019-02-05
申請(qǐng)公布號(hào) CN108410803B 申請(qǐng)公布日 2019-02-05
分類號(hào) C12N5/077;C12N5/0775 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 田紅青 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 南京千年健干細(xì)胞基因工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳市蘭鋒知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 湖南源品細(xì)胞生物科技有限公司
地址 410100 湖南省長(zhǎng)沙市長(zhǎng)沙縣長(zhǎng)沙經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)泉塘街道漓湘路98號(hào)宿舍樓205
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞成軟骨分化的培養(yǎng)方法和培養(yǎng)液，包括如下步驟：(1)取皮下脂肪組織，沖洗、除去脂肪組織膜和血管剪成碎塊，酶消化，加入完全培養(yǎng)基，離心去除脂肪細(xì)胞及脂滴，重懸于完全培養(yǎng)基，接種于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)24h后換培養(yǎng)液除去未貼壁細(xì)胞，每3天換液，細(xì)胞融合后用0.25％胰酶和1mmol/L EDTA 37℃消化3～5min，完全培養(yǎng)基終止消化，1:2比例傳代；(2)傳代細(xì)胞接種于含有完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)48h后更換培養(yǎng)基為不完全培養(yǎng)基，加入Sox9基因激活劑繼續(xù)培養(yǎng)，每3d換一次培養(yǎng)基。本發(fā)明提供的方法可以有效誘導(dǎo)脂肪干細(xì)胞成軟骨分化，可以以脂肪干細(xì)胞為種子細(xì)胞制備得到大量軟骨細(xì)胞以滿足臨床對(duì)軟骨細(xì)胞的需求。