一種提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖率的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810261745.1 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN108486049B 公開(kāi)（公告）日 2019-05-31
申請(qǐng)公布號(hào) CN108486049B 申請(qǐng)公布日 2019-05-31
分類號(hào) C12N5/0775（2010.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 田紅青 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 南京千年健干細(xì)胞基因工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京卓特專利代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 吉林奧唯姿生物醫(yī)學(xué)工程有限公司
地址 130000 吉林省長(zhǎng)春市北湖科技開(kāi)發(fā)區(qū)盛北大街3333號(hào)北湖科技園產(chǎn)業(yè)一期B3二樓22-3號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種提高骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖率的方法，包括如下步驟：(1)將人骨髓小心疊加于等體積的淋巴細(xì)胞分離液上層，4℃條件2000r/min離心20min，吸取分離液和血漿界面云霧狀的單個(gè)核細(xì)胞層，用無(wú)血清IMDM懸浮后，以1000r/min離心，按2×105/cm2密度接種于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，48h后換液，將不貼壁的細(xì)胞洗去，貼壁細(xì)胞每3d換液，待細(xì)胞融合度達(dá)80％以上時(shí)，用胰酶消化傳代；(2)取傳代細(xì)胞以2×104/cm2的密度接種于含有無(wú)血清IMDM的培養(yǎng)瓶中，37℃，5％CO2培養(yǎng)48h后，加入miR?196a表達(dá)抑制劑繼續(xù)培養(yǎng)24～72h。本發(fā)明提供的方法比常規(guī)培養(yǎng)方法具有更高的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖率，有助于較快獲得大量骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞用于干細(xì)胞移植等手術(shù)治療。