一種熱穩(wěn)定性改良的木聚糖酶xyn-LVK及其基因

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510741237.X 申請日 -
公開（公告）號 CN106676086B 公開（公告）日 2019-07-16
申請公布號 CN106676086B 申請公布日 2019-07-16
分類號 C12N9/42;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/11;C12R1/84 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王劍英;郭宏濤;白孟飛;吳亞寧;譚福建 申請（專利權(quán)）人 安徽綠微康生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳市萬商天勤知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所（普通合伙） 代理人 安徽綠微康生物科技有限公司
地址 247099 安徽省池州市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)雙龍路1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種熱穩(wěn)定性改良的木聚糖酶xyn?LVK，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本發(fā)明通過理性設(shè)計(jì)，在木聚糖酶xyn?CDBFV的N端結(jié)構(gòu)域和催化中心之間設(shè)計(jì)引入7位/217位和11位/45位二硫鍵，即得到重組木聚糖酶xyn?LVK，在xyn?LVK中，N端結(jié)構(gòu)域和催化中心之間有三個(gè)二硫鍵，它們使N端結(jié)構(gòu)域這個(gè)“夾子”更穩(wěn)固的夾住催化中心，使突變酶在高溫下更加穩(wěn)定。將xyn?LVK在畢赤酵母中表達(dá)后，與木聚糖酶xyn?CDBFV相比，突變后的酶的熱穩(wěn)定性得到了明顯的提高，在90℃處理4min還能保留65％的酶活，處理8min后還有42％的剩余酶活性。