高產(chǎn)熱穩(wěn)定性木聚糖酶的里氏木霉基因工程菌的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201510741236.5 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN106676126B 公開(公告)日 2019-08-13
申請(qǐng)公布號(hào) CN106676126B 申請(qǐng)公布日 2019-08-13
分類號(hào) C12N15/80;C12N1/15 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 白孟飛;王劍英;郭宏濤;吳亞寧;林智 申請(qǐng)(專利權(quán))人 安徽綠微康生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳市萬商天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所(普通合伙) 代理人 安徽綠微康生物科技有限公司;深圳市芭格美生物科技有限公司
地址 247099 安徽省池州市經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)雙龍路1號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種高產(chǎn)熱穩(wěn)定性木聚糖酶的里氏木霉基因工程菌的制備方法,包括以下步驟:合成依次由里氏木霉甘油醛?3?磷酸脫氫酶啟動(dòng)子、里氏木霉cbh1信號(hào)肽序列、木聚糖酶xyn?LVK基因序列和里氏木霉甘油醛?3?磷酸脫氫酶終止子組成的表達(dá)框序列;將表達(dá)框序列克隆至pUC19中,得到重組表達(dá)質(zhì)粒;將重組表達(dá)質(zhì)粒和pAN7?1載體輕輕混勻,共轉(zhuǎn)里氏木霉原生質(zhì)體,經(jīng)篩選得到高產(chǎn)熱穩(wěn)定性木聚糖酶xyn?LVK的里氏木霉基因工程菌。本發(fā)明中木聚糖酶xyn?LVK在里氏木霉中表達(dá)后,與木聚糖酶xyn?LVK在畢赤酵母中的表達(dá)相比,木聚糖酶xyn?LVK的產(chǎn)量提升約40%。