一種人胎盤成肌纖維母細(xì)胞的簡易分離及鑒定方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310090742.3 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN103173405B 公開（公告）日 2017-11-07
申請公布號(hào) CN103173405B 申請公布日 2017-11-07
分類號(hào) C12N5/074(2010.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;G01N15/14(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王云虹;李志剛;丁煒;王穎穎;高長青;楊海蓮;武曉云;黃芳蕾;聶晨飛;劉潔;李大為;安志達(dá);吳蘭蘭;馬瑞;呂巖;康會(huì)彥;劉學(xué)敏;柏小麗 申請（專利權(quán)）人 北京京蒙高科干細(xì)胞技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京尚誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京京蒙高科干細(xì)胞技術(shù)有限公司
地址 100085 北京市海淀區(qū)上地東路5-2號(hào)京蒙高科大廈B座601
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及建立人胎盤成肌纖維母細(xì)胞的分離及鑒定方法。把胎盤胎兒面蛻膜組織機(jī)械破碎后，通過含膠原酶I的DMEM消化液消化，分離為單個(gè)核細(xì)胞，用含有10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基在37℃、5%CO2、飽和濕度下培養(yǎng)，誘導(dǎo)貼壁，48小時(shí)后全量換液，去除非貼壁細(xì)胞，添加新鮮培養(yǎng)基，待貼壁細(xì)胞形成單克隆后，分別培養(yǎng)各單克隆細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融合90%左右時(shí)，胰酶傳代，即得成肌纖維母細(xì)胞。本發(fā)明采用細(xì)胞形態(tài)學(xué)，細(xì)胞周期，細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測，細(xì)胞成脂、成骨分化能力檢測，細(xì)胞多能干細(xì)胞因子檢測及細(xì)胞結(jié)蛋白表達(dá)檢測的組合方法鑒定所得成肌纖維母細(xì)胞。