一種構(gòu)建雙識(shí)別位點(diǎn)納米孔的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010312465.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN111413383B 公開(kāi)(公告)日 2021-03-02
申請(qǐng)公布號(hào) CN111413383B 申請(qǐng)公布日 2021-03-02
分類號(hào) G01N27/327(2006.01)I;G01N27/48(2006.01)I 分類 測(cè)量;測(cè)試;
發(fā)明人 李偉;周智 申請(qǐng)(專利權(quán))人 深圳市梅麗納米孔科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳市精英專利事務(wù)所 代理人 李翔宇
地址 518000廣東省深圳市坪山新區(qū)坪山街道錦龍大道寶山路16號(hào)??婆d戰(zhàn)略新興產(chǎn)業(yè)園B棟8樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種構(gòu)建雙識(shí)別位點(diǎn)納米孔的方法,包括:對(duì)融合表達(dá)的兩種單識(shí)別位點(diǎn)納米孔進(jìn)行結(jié)構(gòu)域功能分析,獲得結(jié)構(gòu)域分析結(jié)果;選擇結(jié)構(gòu)域基因,進(jìn)行融合蛋白設(shè)計(jì),獲得具有兩個(gè)識(shí)別位點(diǎn)的融合蛋白;選擇保證融合蛋白結(jié)構(gòu)穩(wěn)定及可聚合的表達(dá)系統(tǒng),根據(jù)表達(dá)系統(tǒng)的宿主種類,并依次完成表達(dá)方案設(shè)計(jì)、表達(dá)條件優(yōu)化、孔道蛋白聚合、純化分離、嵌孔及測(cè)序以及融合蛋白突變的處理;本申請(qǐng)使用天然存在的單識(shí)別位點(diǎn)的納米孔蛋白,通過(guò)工程化的融合蛋白表達(dá)技術(shù),獲得雙識(shí)別位點(diǎn)的納米孔道蛋白,大大擴(kuò)展了納米孔蛋白的可選擇范圍,解決了天然存在的雙敏感位點(diǎn)的蛋白納米孔極少的問(wèn)題。通過(guò)突變了優(yōu)化孔道的性能,提高孔道的檢測(cè)性能。??