一種表達(dá)新型冠狀病毒N蛋白的方法
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010915134.1 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(公告)號(hào) | CN112225781B | 公開(公告)日 | 2021-07-06 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN112225781B | 申請(qǐng)公布日 | 2021-07-06 |
分類號(hào) | C07K14/165;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;C12R1/19 | 分類 | 有機(jī)化學(xué)〔2〕; |
發(fā)明人 | 程立坤;王靜;楊秀艷;趙修報(bào);楊光;林初文;王景超;董艷凱;沈志強(qiáng) | 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 清源生物(深圳)有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 北京瑞盛銘杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) | 代理人 | 栗華楠 |
地址 | 518000 廣東省深圳市南山區(qū)桃源街道麗水路2279號(hào) | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明屬于免疫技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種高效表達(dá)新型冠狀病毒N蛋白的方法。本發(fā)明按照2.0%?3.0%的接種量將種子液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基中,培養(yǎng)溫度為35?37℃,pH值維持在7.3?7.5,維持溶氧水平在30%左右;當(dāng)初始碳源耗盡后,根據(jù)溶氧反饋補(bǔ)料策略,溶氧水平升至50%?60%時(shí)補(bǔ)加50%?80%甘油溶液;溶氧水平降至20%?30%時(shí)停止補(bǔ)加,如此反復(fù);當(dāng)細(xì)菌濃度達(dá)到1.0?3.0時(shí),加入0.3?1mM IPTG進(jìn)行誘導(dǎo),且繼續(xù)培養(yǎng)2h后,再次加入0.3mM IPTG進(jìn)行二次誘導(dǎo),總誘導(dǎo)為6?8h??梢詫?shí)現(xiàn)新冠病毒截短N(yùn)蛋白的可溶性高效表達(dá),能滿足大規(guī)模生產(chǎn)可溶性新冠病毒N蛋白的需求。 |
