一種可高效用于黏細(xì)菌原核轉(zhuǎn)錄組建庫(kù)測(cè)序的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110997140.0 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113736851A 公開（公告）日 2021-12-03
申請(qǐng)公布號(hào) CN113736851A 申請(qǐng)公布日 2021-12-03
分類號(hào) C12Q1/6806（2018.01）I;C12N15/10（2006.01）I;C40B50/06（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 董紅紅;朱紅惠;董義杰;姚青 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 廣東省科學(xué)院微生物研究所（廣東省微生物分析檢測(cè)中心）
代理機(jī)構(gòu) 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 劉明星;朱聰聰
地址 510070廣東省廣州市先烈中路100號(hào)大院56號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種可高效用于黏細(xì)菌原核轉(zhuǎn)錄組建庫(kù)測(cè)序的方法。它包括樣品準(zhǔn)備、RNA提取、mRNA富集及片段化，將mRNA反轉(zhuǎn)錄第一鏈cDNA，再合成第二鏈cDNA、構(gòu)建文庫(kù)、上機(jī)測(cè)序和對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，其特征在于，所述的將mRNA反轉(zhuǎn)錄第一鏈cDNA，其使用的逆轉(zhuǎn)錄酶是Uni Reverse Transcriptase逆轉(zhuǎn)錄酶。本發(fā)明通過(guò)實(shí)驗(yàn)的手段證明了利用耐高溫的逆轉(zhuǎn)錄酶可以顯著提升轉(zhuǎn)錄的效率，有效提升高GC含量細(xì)菌的原核轉(zhuǎn)錄組測(cè)序成功率。