高效表達抗EGFR單克隆抗體細胞的篩選培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011192793.3 申請日 -
公開（公告）號 CN112391350A 公開（公告）日 2021-02-23
申請公布號 CN112391350A 申請公布日 2021-02-23
分類號 C12N5/10(2006.01)I; 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 于紅陽;申陽陽;王紅麗;胡桂珍;楊仲璠;徐明波 申請（專利權）人 北京雙鷺立生醫(yī)藥科技有限公司
代理機構 北京知呱呱知識產權代理有限公司 代理人 孫志一
地址 100000北京市海淀區(qū)西三環(huán)北路100號金玉大廈1103-1105室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明實施例公開了一種高效表達抗EGFR單克隆抗體細胞的篩選培養(yǎng)方法，所述方法包括：將重組抗EGFR單克隆抗體的種子細胞復蘇，在Actipro基礎培養(yǎng)基中放大培養(yǎng)后得到種子細胞培養(yǎng)懸液，將所述種子細胞培養(yǎng)懸液接種，發(fā)酵培養(yǎng)，定期流加補料培養(yǎng)基和葡萄糖溶液，培養(yǎng)至細胞活率低于80％，收獲發(fā)酵培養(yǎng)液，得到所述高效表達抗EGFR單克隆抗體細胞培養(yǎng)液。本發(fā)明方法篩選高效分泌表達抗EGFR抗體的敲除巖藻糖轉移酶基因的CHO細胞系，使所表達的蛋白無巖藻糖修飾，以增強重組抗EGFR單抗的ADCC作用，增強其抗腫瘤效果，擴大適用人群。??