用于測定末端轉(zhuǎn)移酶活性的方法及試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811041659.6 申請日 -
公開(公告)號 CN109055505B 公開(公告)日 2021-10-08
申請公布號 CN109055505B 申請公布日 2021-10-08
分類號 C12Q1/6851;C12Q1/48 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 蔡統(tǒng)聰 申請(專利權(quán))人 廣東菲鵬生物有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京超凡志成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 逯恒
地址 523000 廣東省東莞市松山湖高新技術(shù)產(chǎn)業(yè)開發(fā)區(qū)花蓮路5號1號廠房7樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種用于測定末端轉(zhuǎn)移酶(TdT)活性的方法及試劑盒。所述方法包括:使用TdT在第一單鏈線性DNA的3’末端加上PolydN;將第二單鏈線性DNA作為第二單鏈模板,所述第二單鏈線性DNA的3’末端具有PolydN',所述第二單鏈模板與所述第一單鏈模板僅通過N?N'部分進(jìn)行互補(bǔ)配對;補(bǔ)齊互補(bǔ)DNA后進(jìn)行擴(kuò)增并定量檢測擴(kuò)增產(chǎn)物,并根據(jù)所述擴(kuò)增產(chǎn)物含量與所述TdT酶活的對應(yīng)關(guān)系確定所述TdT活性;擴(kuò)增時所用上下游引物分別與所述第一單鏈模板及所述第二單鏈模板結(jié)合,且結(jié)合部分不包括N?N'互補(bǔ)區(qū),或同時包括N?N'互補(bǔ)區(qū)與非N?N'互補(bǔ)區(qū)。該方法操作步驟簡單快速,試劑成本低,靈敏度高。