艱難梭菌外毒素A羧基端序列密碼子優(yōu)化基因片段、表達(dá)載體構(gòu)建方法及其表達(dá)蛋白的應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210568057.2 申請日 -
公開（公告）號 CN103865938B 公開（公告）日 2016-10-05
申請公布號 CN103865938B 申請公布日 2016-10-05
分類號 C12N15/31(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C07K16/12(2006.01)I;A61K39/08(2006.01)I;A61P31/04(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 劉紅;馮東曉;邢平平;徐從倫;李敏;郭桂平;于錦麗;趙志偉 申請（專利權(quán)）人 綠葉投資集團(tuán)有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 264670 山東省煙臺市高新區(qū)科技大道39號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及密碼子改造的艱難梭菌外毒素A羧基端基因片段、表達(dá)載體構(gòu)建方法及其在大腸桿菌中的高效表達(dá)。該密碼子改造后的基因序列既兼顧大腸桿菌密碼子使用偏好，又降低了原始基因重復(fù)序列對于基因合成和表達(dá)的影響。本研究所涉及的高效表達(dá)載體由密碼子改造后的艱難梭菌外毒素A羧基端基因與原核表達(dá)載體pET32b(+)組成，經(jīng)IPTG誘導(dǎo)后可以高表達(dá)出帶His標(biāo)簽的融合蛋白。該融合蛋白經(jīng)凝血酶酶切后可以釋放艱難梭菌外毒素A羧基端約872個氨基酸片段。本研究中經(jīng)密碼子改造的艱難梭菌外毒素A羧基端基因片段可以大腸桿菌中高效融合表達(dá)，純化后的蛋白作為抗原可用于制備抗艱難梭菌外毒素A抗體和抗艱難梭菌感染疫苗的制備。