一種重組SLO蛋白及其制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201410349271.8 申請日 -
公開（公告）號 CN104098659A 公開（公告）日 2014-10-15
申請公布號 CN104098659A 申請公布日 2014-10-15
分類號 C07K14/315(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C12N15/31(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 陽艷華;黃英星 申請（專利權(quán)）人 桂林英美特生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 桂林市持衡專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 代理人 桂林英美特生物技術(shù)有限公司
地址 541004 廣西壯族自治區(qū)桂林市高新區(qū)信息產(chǎn)業(yè)園D-02號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種重組SLO蛋白及其制備方法。所述的制備方法包括：1)SLO基因的擴(kuò)增及SLO-pGEX-2T表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建；2)重組表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌及陽性工程菌的篩選；3)陽性工程菌的擴(kuò)大培養(yǎng)和誘導(dǎo)表達(dá)；4)表達(dá)菌液的收集、裂解并采用DEAE-Sepharose陰離子交換柱純化技術(shù)純化目的重組蛋白。本發(fā)明采用pGEX-2T表達(dá)質(zhì)粒與SLO基因進(jìn)行重組，然后轉(zhuǎn)染大腸桿菌，經(jīng)過發(fā)酵每升菌液可以獲得100mg以上的可溶性重組SLO蛋白，產(chǎn)率高；采用DEAE-Sepharose陰離子交換柱純化技術(shù)，兩次純化操作即可獲得純度大于90％的重組SLO蛋白，與親和層析相比，處理量更大，成本更低。