一種腫瘤免疫治療效果的基因檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310690714.5 申請日 -
公開(公告)號 CN103865998A 公開(公告)日 2014-06-18
申請公布號 CN103865998A 申請公布日 2014-06-18
分類號 C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周菊華 申請(專利權)人 杭州赫思緹生物科技有限公司
代理機構 - 代理人 -
地址 310013 浙江省杭州市西湖區(qū)外東山弄11號3幢1單元101室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種腫瘤免疫治療效果的基因檢測方法。該方法從抗腫瘤的淋巴細胞和來自癌癥患者的外周血單個核細胞提取RNA樣品,然后合成cDNA;再利用通用引物和T細胞受體特定引物來擴增T細胞受體β鏈基因可變區(qū)段;擴增后的T細胞受體β鏈基因可變區(qū)段產(chǎn)物,經(jīng)純化后克隆到pcDNA3.1/TA載體。然后克隆的載體轉(zhuǎn)化到感染態(tài)細菌細胞,培養(yǎng)形成單克隆細菌群落。單克隆細菌群落進一步進行液體培養(yǎng),分離純化質(zhì)粒DNA,用TCR-CB-50R引物進行T細胞受體β鏈基因可變區(qū)段的序列測定;或者單克隆細菌群落不經(jīng)液體培養(yǎng)直接進行測序;最后進行序列比對,確定輸入癌癥患者體內(nèi)的抗腫瘤淋巴細胞是否在病人存活,從而早期判斷腫瘤免疫治療的效果。