一種腫瘤免疫治療效果的基因檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310690714.5 申請日 -
公開（公告）號 CN103865998B 公開（公告）日 2016-04-20
申請公布號 CN103865998B 申請公布日 2016-04-20
分類號 C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 周菊華 申請（專利權(quán)）人 杭州赫思緹生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京鼎佳達(dá)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 周菊華;杭州赫思緹生物科技有限公司
地址 310013 浙江省杭州市西湖區(qū)外東山弄11號3幢1單元101室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種腫瘤免疫治療效果的基因檢測方法。該方法從抗腫瘤的淋巴細(xì)胞和來自癌癥患者的外周血單個核細(xì)胞提取RNA樣品，然后合成cDNA；再利用通用引物和T細(xì)胞受體特定引物來擴(kuò)增T細(xì)胞受體β鏈基因可變區(qū)段；擴(kuò)增后的T細(xì)胞受體β鏈基因可變區(qū)段產(chǎn)物，經(jīng)純化后克隆到pcDNA3.1／TA載體。然后克隆的載體轉(zhuǎn)化到感染態(tài)細(xì)菌細(xì)胞，培養(yǎng)形成單克隆細(xì)菌群落。單克隆細(xì)菌群落進(jìn)一步進(jìn)行液體培養(yǎng)，分離純化質(zhì)粒DNA，用TCR-CB-50R引物進(jìn)行T細(xì)胞受體β鏈基因可變區(qū)段的序列測定；或者單克隆細(xì)菌群落不經(jīng)液體培養(yǎng)直接進(jìn)行測序；最后進(jìn)行序列比對，確定輸入癌癥患者體內(nèi)的抗腫瘤淋巴細(xì)胞是否在病人存活，從而早期判斷腫瘤免疫治療的效果。