一種原位雜交探針的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201711000583.8 申請日 -
公開（公告）號 CN107603971B 公開（公告）日 2020-02-04
申請公布號 CN107603971B 申請公布日 2020-02-04
分類號 C12N15/10 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 蔣曉群 申請（專利權(quán)）人 廈門龍進(jìn)生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廈門市精誠新創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 廈門龍進(jìn)生物科技有限公司
地址 361000 福建省廈門市海滄區(qū)翁角西路2052號海滄生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)園2號樓第3層01單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種原位雜交探針的制備方法。方法為，將目標(biāo)DNA片段化，回收150?600bp的片段，經(jīng)過酶修飾處理，與含有限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)序列的DNA銜接子間隔連接成DNA大環(huán)和長鏈；A或B進(jìn)行大量DNA的獲得和標(biāo)記：A等溫?cái)U(kuò)增，擴(kuò)增時(shí)加入帶有標(biāo)記物的單核苷酸底物，得到帶有標(biāo)記物的DNA產(chǎn)物；或B等溫?cái)U(kuò)增，所得產(chǎn)物以缺口平移法或隨機(jī)引物法摻入帶有標(biāo)記物的單核苷酸底物，得到帶有標(biāo)記物的DNA產(chǎn)物；對所得帶有標(biāo)記物的DNA產(chǎn)物用對應(yīng)的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行消化，即得到長度為150?600bp的原位雜交探針。本發(fā)明所述方法準(zhǔn)確地控制了探針的長度范圍，降低了生產(chǎn)成本，提高了產(chǎn)品質(zhì)量。