基于Sanger測序的黃熱病毒全基因組測序方法、成套引物對和應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911261692.4 申請日 -
公開（公告）號 CN110894555A 公開（公告）日 2020-03-20
申請公布號 CN110894555A 申請公布日 2020-03-20
分類號 C12Q1/70;C12Q1/6869;C12N15/11;C12R1/93 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 文潔 申請（專利權(quán)）人 奧維森基因科技（天津）有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京超凡宏宇專利代理事務(wù)所（特殊普通合伙） 代理人 李雙艷
地址 300000 天津市自貿(mào)試驗區(qū)中環(huán)西路86號中科天保智谷14號樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種基于Sanger測序的黃熱病毒全基因組測序方法、成套引物對和應(yīng)用，涉及病毒檢測技術(shù)領(lǐng)域。該方法包括提供黃熱病毒的cDNA；然后使用成套引物對對黃熱病毒的cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到位于黃熱病毒全基因組中不同區(qū)域的片段，相鄰片段之間含有用于拼接的重疊區(qū)域；各片段拼接后的全序列覆蓋黃熱病毒全基因組全長；使用Sanger雙脫氧鏈終止法對PCR擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行測序，然后對測序序列進(jìn)行拼接。該測序方法操作簡單，測序結(jié)果準(zhǔn)確度高，用于檢測黃熱病毒減毒活疫苗中的毒株可以從基因組的序列水平上保證毒株沒有發(fā)生突變，毒性沒有發(fā)生改變，進(jìn)而確保了疫苗生產(chǎn)的安全性。