一種重組人角質(zhì)細胞生長因子生物學活性檢測方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610633571.8 申請日 -
公開（公告）號 CN106226511B 公開（公告）日 2018-04-06
申請公布號 CN106226511B 申請公布日 2018-04-06
分類號 G01N33/53 分類 測量；測試;
發(fā)明人 高婧;羅雙儒;代亞東;覃安友;黎耘;張寶華;李曉鵬;李月華 申請（專利權）人 信立泰（蘇州）藥業(yè)有限公司
代理機構(gòu) 深圳市科吉華烽知識產(chǎn)權事務所（普通合伙） 代理人 胡吉科
地址 215421 江蘇省蘇州市太倉市沙溪鎮(zhèn)夢溪路1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種重組人角質(zhì)細胞生長因子(rhKGF?1)檢測方法，它包括以下步驟：1)細胞培養(yǎng)；2)細胞接種，控制細胞密度；3)rhKGF?1樣品經(jīng)處理后，進行濃度梯度稀釋，并在各rhKGF?1濃度稀釋度中加入5?乙炔基?2"?脫氧尿苷(EdU)，以制備含有一系列rhKGF?1濃度稀釋度的上樣樣品；4)對步驟2)所述的細胞板中的細胞進行洗滌，去除培養(yǎng)基；5)將步驟3)所述的上樣樣品上樣于步驟4)中所述的細胞培養(yǎng)板中，培養(yǎng)孵育細胞；6)將步驟5)所述的細胞進行固化和透化處理后，EdU進行“Click?iT”反應；7)將步驟6)中經(jīng)過處理后的細胞放置于多功能酶標儀中讀取熒光強度(RFU)，計算rhKGF?1生物學活性。本發(fā)明所使用的方法具有檢測背景低、靈敏度高、專屬性強、準確度高、重復性好等優(yōu)點，尤其適用于rhKGF?1生物學活性的檢測及質(zhì)量標準的建立。