一種由畢赤酵母表達串聯(lián)蛋白的純化工藝

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811602069.6 申請日 -
公開（公告）號 CN111363025A 公開（公告）日 2020-07-03
申請公布號 CN111363025A 申請公布日 2020-07-03
分類號 C07K14/62;C12P21/06;C07K1/30;C07K1/16;C07K1/34;C07K1/36 分類 -
發(fā)明人 賈偉平;李校堃;程萍;倪晶 申請（專利權(quán)）人 浙江浙新醫(yī)藥科技有限公司
代理機構(gòu) 上海一平知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 徐林強;徐迅
地址 201203 上海市浦東新區(qū)中國（上海）自由貿(mào)易試驗區(qū)蔡倫路780號208室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種由畢赤酵母表達串聯(lián)蛋白的純化工藝。具體地，本發(fā)明提供一種重組人胰島素原C肽串聯(lián)蛋白的純化方法，包括步驟：(1)對發(fā)酵液進行離心，得到發(fā)酵離心上清液；(2)加入電解質(zhì)進行鹽析，得到沉淀蛋白；(3)加入復(fù)溶劑，得到沉淀蛋白復(fù)溶液；(4)沉淀蛋白復(fù)溶液經(jīng)第一柱層析純化；(5)加入胰蛋白酶和羧肽酶B進行雙酶切，得到酶切液；(6)對所述的酶切液依次進行反相超濾和正相超濾，得到超濾液；(7)所述的超濾液經(jīng)第二柱層析純化；(8)進行正相超濾，得到重組人胰島素原C肽原液。本發(fā)明所述方法能夠制備高純度和高收率的重組人胰島素原C肽。