基于多重PCR的二代測(cè)序建庫技術(shù)

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201611145969.3 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN106498504A 公開(公告)日 2017-03-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN106498504A 申請(qǐng)公布日 2017-03-15
分類號(hào) C40B50/06(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 王筱恬;徐峰 申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海美迪維康生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 200131 上海市浦東新區(qū)中國(上海)自由貿(mào)易試驗(yàn)區(qū)金科路2966號(hào)223室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域,特別涉及二代測(cè)序文庫構(gòu)建技術(shù)。該方案中利用兩輪多重PCR來建庫。針對(duì)每個(gè)靶標(biāo)區(qū)域或者靶標(biāo)位點(diǎn),設(shè)計(jì)兩條特異性引物,上游的引物OP用于第一輪多重PCR,下游的引物IP用于第二輪多重PCR。將第二輪PCR產(chǎn)物純化后,進(jìn)行Q?PCR定量,稀釋到合適的濃度用于二代測(cè)序。本發(fā)明能夠有效的縮短Ampliseq試劑盒存在的問題,對(duì)于客戶定制化的panel設(shè)計(jì)生產(chǎn)周期只需要兩周,并降低單個(gè)樣本建庫的成本,且Ion?Torrent和Illumina測(cè)序平臺(tái)都通用。