檢測肺炎鏈球菌的RPA方法、其專用引物和探針及用途

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202210164196.2 申請日 -
公開(公告)號 CN114480689A 公開(公告)日 2022-05-13
申請公布號 CN114480689A 申請公布日 2022-05-13
分類號 C12Q1/689(2018.01)I;C12Q1/6844(2018.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12R1/46(2006.01)N 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 龔正華;唐敏;夏震遙;盧甜 申請(專利權)人 深圳市研元生物科技有限公司
代理機構 北京棘龍知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 -
地址 518125廣東省深圳市寶安區(qū)航城街道三圍社區(qū)航城大道159號航城創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)園A4棟3A10
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種檢測肺炎鏈球菌的RPA方法、其專用引物、探針和用途,其專用引物和探針是基于肺炎鏈球菌特異性保守序列設計的,具有SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的寡核苷酸序列。本發(fā)明首次將新型恒溫擴增技術RPA應用于肺炎鏈球菌的檢測中,該方法模擬體內DNA復制的酶反應過程,依賴特定的酶和蛋白組合,包括重組酶、單鏈結合蛋白和DNA聚合酶,對DNA模板進行擴增,可在37℃的恒溫下實現(xiàn)特定核酸序列的擴增,擴增產(chǎn)物可通過側向層析核酸試檢測紙條實現(xiàn)可視化判別。本發(fā)明建立的檢測方法靈敏度可達10拷貝數(shù)/μL,特異性高,對硬件設備的要求很低,且可在30min內完成檢測,無需對樣品進行復雜處理、適合現(xiàn)場檢測,適于推廣應用。