檢測肺炎鏈球菌的RPA方法、其專用引物和探針及用途

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202210164196.2 申請日 -
公開（公告）號 CN114480689A 公開（公告）日 2022-05-13
申請公布號 CN114480689A 申請公布日 2022-05-13
分類號 C12Q1/689（2018.01）I;C12Q1/6844（2018.01）I;C12N15/11（2006.01）I;C12R1/46（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 龔正華;唐敏;夏震遙;盧甜 申請（專利權(quán)）人 深圳市研元生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京棘龍知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 -
地址 518125廣東省深圳市寶安區(qū)航城街道三圍社區(qū)航城大道159號航城創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)園A4棟3A10
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種檢測肺炎鏈球菌的RPA方法、其專用引物、探針和用途，其專用引物和探針是基于肺炎鏈球菌特異性保守序列設(shè)計的，具有SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示的寡核苷酸序列。本發(fā)明首次將新型恒溫擴(kuò)增技術(shù)RPA應(yīng)用于肺炎鏈球菌的檢測中，該方法模擬體內(nèi)DNA復(fù)制的酶反應(yīng)過程，依賴特定的酶和蛋白組合，包括重組酶、單鏈結(jié)合蛋白和DNA聚合酶，對DNA模板進(jìn)行擴(kuò)增，可在37℃的恒溫下實現(xiàn)特定核酸序列的擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物可通過側(cè)向?qū)游龊怂嵩嚈z測紙條實現(xiàn)可視化判別。本發(fā)明建立的檢測方法靈敏度可達(dá)10拷貝數(shù)/μL，特異性高，對硬件設(shè)備的要求很低，且可在30min內(nèi)完成檢測，無需對樣品進(jìn)行復(fù)雜處理、適合現(xiàn)場檢測，適于推廣應(yīng)用。