多能干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法和用途

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202210113503.4 申請日 -
公開（公告）號 CN114480253A 公開（公告）日 2022-05-13
申請公布號 CN114480253A 申請公布日 2022-05-13
分類號 C12N5/071（2010.01）I;G01N21/64（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 付建;江利香;楊佳銀;劉雨晴 申請（專利權(quán)）人 深圳市三啟生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京清亦華知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 -
地址 518100廣東省深圳市寶安區(qū)西鄉(xiāng)街道桃花源科技創(chuàng)新園A棟孵化樓115-124、127-130
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及細(xì)胞工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及多能干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞的培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法和用途。本發(fā)明提供一種培養(yǎng)基組合物，該培養(yǎng)基組合物中含有腺苷酸環(huán)化酶激活劑、ALK5抑制劑、生長因子、OSM等因子，利用該培養(yǎng)基能夠大大提升由iPSC誘導(dǎo)分化獲得的肝細(xì)胞的成熟度。表現(xiàn)為ASGR1+細(xì)胞比例提升，以及分泌ALB水平提升。本發(fā)明利用基因編輯和重組技術(shù)在ASGR1基因中添加報告基因，將含有這兩種基因的載體導(dǎo)入多能干細(xì)胞，當(dāng)多能干細(xì)胞誘導(dǎo)分化為肝細(xì)胞后，報告基因和ASGR1共表達(dá)，從而有助于檢測ASGR1+肝細(xì)胞亞群在分化細(xì)胞中的比例，且利用FACS檢測或分選ASGR1+細(xì)胞群，無需額外實驗操作，細(xì)胞消化后可直接上機(jī)檢測或分選，利用本發(fā)明的檢測方法能實現(xiàn)高通量檢測。