基于HEK293T克隆篩選的用于高滴度慢病毒生產(chǎn)的懸浮馴化方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111258035.1 申請日 -
公開（公告）號 CN113981007A 公開（公告）日 2022-01-28
申請公布號 CN113981007A 申請公布日 2022-01-28
分類號 C12N15/867（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I;C12Q1/02（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 胡迪超;馬紅;隋禮麗;孔令潔 申請（專利權(quán)）人 蘇州博騰生物制藥有限公司
代理機構(gòu) 蘇州新知行知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（特殊普通合伙） 代理人 鄭麗玲
地址 215000江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)新平街388號騰飛創(chuàng)新園3號樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于HEK293T克隆篩選的用于高滴度慢病毒生產(chǎn)的懸浮馴化方法，包括以下步驟：S1適合慢病毒包裝的HEK293T貼壁細(xì)胞的克隆篩選，篩選出侵染效率較高的前若干個克隆細(xì)胞，進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)并建庫，S2對篩選的HEK293T貼壁細(xì)胞進(jìn)行快速懸浮馴化，得到細(xì)胞活率93～98%，且細(xì)胞分散性較好、無明顯聚集的懸浮馴化成功的HEK293T細(xì)胞；S3懸浮HEK293T高滴度慢病毒包裝克隆細(xì)胞的篩選，篩選侵染效率高的病毒上清，所對應(yīng)的克隆細(xì)胞即為慢病毒高產(chǎn)的懸浮HEK293T細(xì)胞克隆。本發(fā)明提供的基于HEK293T克隆篩選的用于高滴度慢病毒生產(chǎn)的懸浮馴化方法，能快速獲得生產(chǎn)高滴度慢病毒的懸浮HEK293T細(xì)胞克隆，所獲得的懸浮HEK293T細(xì)胞克隆能無血清懸浮培養(yǎng)和病毒包裝，病毒滴度高，純化效率高，易于放大生產(chǎn)。