三通道雙淬滅探針檢測(cè)可復(fù)制性慢病毒的試劑及其檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110788280.7 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN113528706A 公開(公告)日 2021-10-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN113528706A 申請(qǐng)公布日 2021-10-22
分類號(hào) C12Q1/70;C12Q1/6851;C12R1/93 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳劍峰;陳慧;沈琴文;王涵宇;孔令潔;隋禮麗 申請(qǐng)(專利權(quán))人 蘇州博騰生物制藥有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州新知行知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 代理人 鄭麗玲
地址 215000 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)新平街388號(hào)騰飛創(chuàng)新園3號(hào)樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種三通道雙淬滅探針檢測(cè)可復(fù)制性慢病毒的試劑,其包括第一引物探針對(duì)、第二引物探針對(duì)和第三引物探針對(duì),第一引物探針對(duì)為VSV?G引物和探針對(duì);第二引物探針對(duì)為gag引物探針對(duì);第三引物探針對(duì)為RPP30引物探針對(duì)。本發(fā)明還公開了可復(fù)制性慢病毒的檢測(cè)方法,步驟為:S1細(xì)胞培養(yǎng);S2準(zhǔn)備待測(cè)樣品;S3制備標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品;S4確定所需的反應(yīng)孔數(shù);S5配制所需的qPCR反應(yīng)液與引物探針的混合液;S6按要求在反應(yīng)孔中添加混合液以及標(biāo)準(zhǔn)品、稀釋液、陰性質(zhì)控NCS、待測(cè)樣品和樣品ERC;S7控制各個(gè)反應(yīng)孔的反應(yīng)過(guò)程;S8用分析軟件得到每個(gè)樣品的Ct值及三個(gè)靶標(biāo)的濃度。本發(fā)明能降低背景信號(hào)值,提高最終信號(hào)值,檢測(cè)靈敏度高,更有利于低濃度的檢測(cè)。