一種骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710101892.8 申請日 -
公開(公告)號(hào) CN106754650A 公開(公告)日 2018-10-02
申請公布號(hào) CN106754650A 申請公布日 2018-10-02
分類號(hào) C12N5/071 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 石佳寧;陳思;胡嘯竹;萬娜;肖陽 申請(專利權(quán))人 黑龍江省鑫正融資擔(dān)保集團(tuán)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 楊佳龍
地址 150028 黑龍江省哈爾濱市科技一街99號(hào)18棟E503室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種骨髓來源的內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)方法,屬于細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。該方法是將已提取的骨髓用紅細(xì)胞裂解液進(jìn)行處理后分離獲得骨髓單個(gè)核細(xì)胞,清洗后將所得單個(gè)核細(xì)胞接種到預(yù)包被纖維連接蛋白的培養(yǎng)皿中利用完全培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)一段時(shí)間后,利用胰蛋白酶消化細(xì)胞后,接種到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行差速貼壁培養(yǎng)和差速消化培養(yǎng)。所用的完全培養(yǎng)基,是在無血清培養(yǎng)基EGM2中添加胎牛血清、血管內(nèi)皮生長因子、糖皮質(zhì)激素、維生素C、上表皮生長因子、堿性成纖維細(xì)胞生長因子、集落刺激因子和血小板源性生長因子制成。該方法操作步驟較簡單、花費(fèi)時(shí)間短,一次分離數(shù)量多,獲得細(xì)胞傳代代次多等特點(diǎn)。