非洲豬瘟病毒P72基因的熒光探針引物組、試劑盒及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110342533.8 申請日 -
公開(公告)號 CN112795706A 公開(公告)日 2021-05-14
申請公布號 CN112795706A 申請公布日 2021-05-14
分類號 C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張蓉;沈俊杰;凌勇;劉鳴慧;余杰;張志剛;吳有林 申請(專利權(quán))人 廈門銀祥集團有限公司
代理機構(gòu) 上??剖⒅R產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 李新新
地址 363001 福建省漳州市薌城區(qū)金峰經(jīng)濟開發(fā)區(qū)興亭路與寶蓮路交叉處
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種非洲豬瘟病毒P72基因的熒光探針引物組、試劑盒及其應(yīng)用,引物包括:上游引物ASFV?F:5’?CCACGGGAGGAATACCAA?3’;下游引物ASFV?R:5’?GCAGATGCCGATACCACA?3’;熒光探物ASFV?P:含有片段5’?TCATATTAACGTATCCAGAGCAAGA?3’,并在5’端標(biāo)記熒光報告基團,在3’端標(biāo)記熒光淬滅基團。試劑盒包括熒光探針引物組、陽性對照、陰性對照和PCR擴增液。應(yīng)用具體為:1)提取待測樣品的總DNA;2)以步驟1)中得到的總DNA為模板,利用試劑盒配制熒光反應(yīng)體系進行熒光擴增;3)利用陽性對照建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,并分析熒光擴增產(chǎn)物,根據(jù)擴增反應(yīng)結(jié)果判定待測樣品為非洲豬瘟病毒核酸陽性或陰性。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明能夠最大限度識別目前流行的所有ASFV毒株,且使引物的靈敏度提高到1.15×101copise/μL。