重組蛋白A基因及其表達(dá)產(chǎn)物的制備

基本信息

申請?zhí)?/td> CN200810240553.9 申請日 -
公開（公告）號 CN101760466A 公開（公告）日 2010-06-30
申請公布號 CN101760466A 申請公布日 2010-06-30
分類號 C12N15/31(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C07K14/31(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 宮照龍;何新舟;曹暉;許允立 申請（專利權(quán)）人 本元正陽基因技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 100176 北京市大興區(qū)北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)永昌中路6號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明是將蛋白A的B結(jié)構(gòu)域基因單體根據(jù)大腸桿菌密碼子的偏愛性進(jìn)行優(yōu)化，構(gòu)建六串體插入熱誘導(dǎo)型大腸桿菌載體pBV220，構(gòu)建了含有該基因的大腸桿菌表達(dá)載體及其轉(zhuǎn)化的大腸桿菌DH5α重組株和利用此菌株生產(chǎn)重組蛋白A的方法。此菌株所產(chǎn)生的可溶性重組蛋白A達(dá)到細(xì)菌可溶性蛋白總量的80％以上，以后只經(jīng)鎳離子螯合層析和分子篩柱層析即可將重組蛋白A純化到95％以上純度，且該蛋白具有表達(dá)量高、成本低、易純化等優(yōu)點(diǎn)。用其制備的重組蛋白A親和填料具有人IgG吸附載量高、proA脫落少等優(yōu)點(diǎn)。本發(fā)明為獲得質(zhì)量高且價格便宜的抗體(藥物)純化介質(zhì)重組蛋白A提供了一條切實(shí)可行的途徑。