一種高效提取厭氧顆粒污泥微生物總RNA的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310724606.5 申請日 -
公開（公告）號 CN103695414A 公開（公告）日 2014-04-02
申請公布號 CN103695414A 申請公布日 2014-04-02
分類號 C12N15/10(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姬丹丹;臧立華;薛嶸;李肖玲 申請（專利權(quán)）人 吉林梅花氨基酸有限責任公司
代理機構(gòu) 濟南圣達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 齊魯工業(yè)大學
地址 250353 山東省濟南市長清區(qū)大學路3501號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于環(huán)境分子生物學技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種高效提取厭氧顆粒污泥微生物總RNA的方法，取活性污泥離心，棄上清，然后向離心管內(nèi)加入滅菌玻璃珠和貯存液Ⅰ，將離心管管蓋擰緊后置于旋渦混合器擊打，離心棄上清，磷酸鹽緩沖液洗滌；加入貯存液Ⅱ溫育；加入TRIzol，漩渦振蕩后離心取上清，加入氯仿，漩渦振蕩，室溫放置并離心取上清，加入異丙醇，－20℃放置后離心棄上清，加入75％乙醇洗滌沉淀，離心棄上清，風干沉淀，貯存液Ⅲ溶解核酸沉淀，加入DNase?I(RNase?free)和RNase抑制劑，采用RNA純化試劑盒純化RNA。簡化了微生物總RNA提取步驟，實現(xiàn)了快速、高效的提取厭氧顆粒污泥的微生物總RNA。