一種高效提取厭氧顆粒污泥微生物總DNA的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201310722060.X 申請日 -
公開(公告)號 CN103710337A 公開(公告)日 2014-04-09
申請公布號 CN103710337A 申請公布日 2014-04-09
分類號 C12N15/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姬丹丹;臧立華;薛嶸;李肖玲 申請(專利權(quán))人 吉林梅花氨基酸有限責(zé)任公司
代理機構(gòu) 濟南圣達知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 齊魯工業(yè)大學(xué)
地址 250353 山東省濟南市長清區(qū)大學(xué)路3501號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于環(huán)境分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種高效提取厭氧顆粒污泥微生物總DNA的方法,步驟如下:菌體離心;固體物用DNA貯存液I洗后加入DNA貯存液Ⅰ、溶菌酶溫育,加入貯存液Ⅱ、貯存液Ⅲ、貯存液Ⅳ溫育;加入酚、氯仿和異戊醇混合液,輕柔8字混勻;離心取上清,加入氯仿和異戊醇混合液,輕柔8字混勻;離心取上清,加入異丙醇,輕柔混勻,-20℃,靜置30min;室溫離心;75%乙醇洗一遍,室溫離心12000r/min,5min;加入貯存液Ⅴ重懸,4℃過夜溶解,即得厭氧顆粒污泥微生物總DNA。本發(fā)明簡化了微生物總DNA提取步驟,實現(xiàn)了快速、高效的提取厭氧顆粒污泥的微生物總DNA。