完整冷凍保存及解凍細(xì)胞內(nèi)核糖體新生肽鏈復(fù)合物的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410387213.4 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN104186460B 公開(公告)日 2016-05-25
申請(qǐng)公布號(hào) CN104186460B 申請(qǐng)公布日 2016-05-25
分類號(hào) A01N1/02(2006.01)I 分類 農(nóng)業(yè);林業(yè);畜牧業(yè);狩獵;誘捕;捕魚;
發(fā)明人 孫黎;張弓;王通;金靜潔 申請(qǐng)(專利權(quán))人 武漢承啟醫(yī)學(xué)科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 蘇運(yùn)貞;陳燕嫻
地址 510632 廣東省廣州市黃埔大道西601號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種完整冷凍保存及解凍細(xì)胞內(nèi)核糖體新生肽鏈復(fù)合物的方法。該方法是在正常生長(zhǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)液中加入翻譯延伸抑制劑,待翻譯延伸抑制劑有效作用于RNC,抑制翻譯延伸的進(jìn)行后,將細(xì)胞冷卻至0~4℃,再用預(yù)冷至0~4℃的PBS溶液清洗細(xì)胞以及加入細(xì)胞中,液氮中快速冷凍,超低溫保存,于冰上解凍,再抽提RNC。本發(fā)明通過采用翻譯延伸抑制劑有效固定核糖體,使之不易解離,將細(xì)胞內(nèi)的翻譯狀況固定下來;再通過液氮急凍方法有效地冷凍保存RNC長(zhǎng)期儲(chǔ)存和運(yùn)輸,并且解凍后所提取的RNC與新鮮細(xì)胞提取的RNC無異,因此本發(fā)明突破了時(shí)間和空間的限制,為研究RNC及開展RNC商業(yè)服務(wù)提供了便利。