制備重組人源神經(jīng)生長因子蛋白質(zhì)的方法及復性液
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201210080228.7 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN102628058A | 公開(公告)日 | 2012-08-08 |
申請公布號 | CN102628058A | 申請公布日 | 2012-08-08 |
分類號 | C12N15/70(2006.01)I;C07K14/48(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I | 分類 | 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 錢永常 | 申請(專利權(quán))人 | 杭州紐龍生物科技有限公司 |
代理機構(gòu) | 北京德琦知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 杭州紐龍生物科技有限公司 |
地址 | 311200 浙江省杭州市蕭山區(qū)北干街道金城路1038號13-3室 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明涉及制備重組人源神經(jīng)生長因子(rhNGF)蛋白質(zhì)的方法及復性液,所述方法包括通過工程大腸桿菌表達rhNGF蛋白質(zhì),破碎表達rhNGF蛋白質(zhì)的工程大腸桿菌菌體,離心收集rhNGF蛋白質(zhì)包涵體,利用變性體系變性溶解包涵體以形成包涵體溶解后溶液,復性液以大于1080ml/min的流速加入到包涵體溶解后溶液中進行復性,純化rhNGF蛋白質(zhì)。所述復性液包含45~55mMTris-HCl,0~10mMβ-巰基乙醇,0~1mM二價銅鹽,0.95~1.05mM?EDTA,pH8.5~10.0。本發(fā)明的方法通過復性液瞬間加入稀釋復性提高了復性率,降低了生產(chǎn)成本,且操作簡單。 |
