制備重組人源神經(jīng)生長因子蛋白質(zhì)的方法及復性液

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201210080228.7 申請日 -
公開(公告)號 CN102628058A 公開(公告)日 2012-08-08
申請公布號 CN102628058A 申請公布日 2012-08-08
分類號 C12N15/70(2006.01)I;C07K14/48(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 錢永常 申請(專利權(quán))人 杭州紐龍生物科技有限公司
代理機構(gòu) 北京德琦知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 杭州紐龍生物科技有限公司
地址 311200 浙江省杭州市蕭山區(qū)北干街道金城路1038號13-3室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及制備重組人源神經(jīng)生長因子(rhNGF)蛋白質(zhì)的方法及復性液,所述方法包括通過工程大腸桿菌表達rhNGF蛋白質(zhì),破碎表達rhNGF蛋白質(zhì)的工程大腸桿菌菌體,離心收集rhNGF蛋白質(zhì)包涵體,利用變性體系變性溶解包涵體以形成包涵體溶解后溶液,復性液以大于1080ml/min的流速加入到包涵體溶解后溶液中進行復性,純化rhNGF蛋白質(zhì)。所述復性液包含45~55mMTris-HCl,0~10mMβ-巰基乙醇,0~1mM二價銅鹽,0.95~1.05mM?EDTA,pH8.5~10.0。本發(fā)明的方法通過復性液瞬間加入稀釋復性提高了復性率,降低了生產(chǎn)成本,且操作簡單。