一種培養(yǎng)表達(dá)重組人表皮生長因子的工程菌的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910897501.7 申請日 -
公開（公告）號 CN110564661A 公開（公告）日 2019-12-13
申請公布號 CN110564661A 申請公布日 2019-12-13
分類號 C12N1/21（2006.01）; C12P21/02（2006.01）; C12R1/19（2006.01） 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 錢永常; 張旭初; 宋葉華 申請（專利權(quán)）人 杭州紐龍生物科技有限公司
代理機構(gòu) 北京德琦知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 杭州紐龍生物科技有限公司
地址 310018 浙江省杭州市蕭山區(qū)寧圍街道泰宏巷40號聯(lián)合中心北區(qū)2幢601室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種培養(yǎng)表達(dá)重組人表皮生長因子的工程菌的方法，所述方法包括下述步驟：(1)一級種子培養(yǎng)，將甘油凍存的工程菌接種至包含卡那霉素的LB液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)，得到一級種子培養(yǎng)液；(2)二級種子培養(yǎng)，將步驟(1)中得到的所述一級種子培養(yǎng)液接種至包含卡那霉素的LB液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)，得到二級種子培養(yǎng)液；(3)將步驟(2)中得到的所述二級種子培養(yǎng)液接種至發(fā)酵罐中，培養(yǎng)，然后誘導(dǎo)，得到發(fā)酵罐上清液；和(4)從步驟(3)中得到的所述發(fā)酵罐上清液中分離和純化重組人表皮生長因子。其中，所述一級種子培養(yǎng)液的OD600為2至3，并且所述二級種子培養(yǎng)液的OD600為3.5至4。通過本發(fā)明的方法，縮短了工程菌的發(fā)酵時間，提高了hEGF的產(chǎn)量。