一種基于切刻酶的雙鏈核酸等溫?cái)U(kuò)增檢測(cè)新方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201410529006.8 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN104726549A | 公開（公告）日 | 2015-06-24 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN104726549A | 申請(qǐng)公布日 | 2015-06-24 |
| 分類號(hào) | C12Q1/68(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 石超;馬翠萍;劉琦;趙海杰 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 青島耐德生物技術(shù)有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | - | 代理人 | - |
| 地址 | 266000 山東省青島市嶗山區(qū)松嶺路99號(hào)青島科技大學(xué) | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明涉及對(duì)雙鏈核酸進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增及檢測(cè)的方法，屬于核酸檢測(cè)領(lǐng)域。更具體的，涉及在切刻內(nèi)切酶和聚合酶的聯(lián)合作用下從雙鏈核酸靶標(biāo)擴(kuò)增出單鏈靶標(biāo)，并應(yīng)用兩條擴(kuò)增引物和一條置換引物在等溫條件下高效特異性擴(kuò)增目標(biāo)核酸的方法。本發(fā)明中通過(guò)對(duì)一條擴(kuò)增引物與擴(kuò)增模板退火區(qū)域的選擇，實(shí)現(xiàn)了僅用三條引物就可完成對(duì)靶標(biāo)核酸的高效特異擴(kuò)增。并且模板的3’端與該引物完全互補(bǔ)，在提高了特異性的同時(shí)避免了傳統(tǒng)技術(shù)中存在置換引物占據(jù)擴(kuò)增引物互補(bǔ)位置而引起的阻滯擴(kuò)增的問(wèn)題。擴(kuò)增引物還可以設(shè)計(jì)為分子信標(biāo)的形式，只有被正確擴(kuò)增的靶標(biāo)序列才會(huì)與該種形式的引物退火并產(chǎn)生后續(xù)熒光信號(hào)，具有更好的特異性。 |
