一種構(gòu)建鏈特異RNA文庫的方法及應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811055627.1 申請日 -
公開（公告）號 CN109234813A 公開（公告）日 2019-01-18
申請公布號 CN109234813A 申請公布日 2019-01-18
分類號 C40B50/06;C12Q1/6869;C12Q1/6806 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 盧文翔;王瑩;涂慧珍;白云飛;顧萬君;朱毅華;鄭衛(wèi)國 申請（專利權(quán)）人 南京迪康金諾生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 南京經(jīng)緯專利商標代理有限公司 代理人 藍霞
地址 211102 江蘇省南京市江寧區(qū)誠信大道1788號中致科技平臺3層301室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種新的構(gòu)建鏈特異RNA文庫的方法，尤其涉及一種構(gòu)建鏈特異RNA文庫的方法及應(yīng)用。該方法將RNA片段化處理得到片段化的RNA，將片段化的RNA逆轉(zhuǎn)錄后采用RNase H消化RNA/DNA雜合體，消化產(chǎn)物與接頭連接得到連接產(chǎn)物，連接產(chǎn)物進行PCR擴增，擴增產(chǎn)物即為鏈特異RNA文庫。本發(fā)明采用RNase H消化RNA/DNA雜合體后，直接進行雙端接頭連接，得到鏈特異性RNA文庫；同時優(yōu)化的反應(yīng)體系使得從樣品RNA到接頭連接完成只需在一管中順次加入反應(yīng)試劑即可進行。與常規(guī)鏈特異性RNA文庫構(gòu)建方法相比，克服了技術(shù)的復(fù)雜性與繁瑣性，節(jié)省了大量人力、時間與試劑成本。