一種基于解旋酶和切刻酶的等溫?cái)U(kuò)增核酸檢測(cè)方法及試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201810922821.9 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN109097448A 公開（公告）日 2018-12-28
申請(qǐng)公布號(hào) CN109097448A 申請(qǐng)公布日 2018-12-28
分類號(hào) C12Q1/6844 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳瑞;陳杰 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳市賽哲生物有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 深圳市賽哲生物有限公司;廣州賽哲生物科技股份有限公司;深圳百納心致生命科學(xué)有限公司
地址 518067 廣東省深圳市南山區(qū)招商街道南海大道以西美年國際廣場(chǎng)1棟604-23
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于解旋酶和切刻酶的等溫?cái)U(kuò)增核酸檢測(cè)方法，包括如下步驟：S1.根據(jù)目標(biāo)核酸序列設(shè)計(jì)特異性擴(kuò)增引物和帶有切刻酶識(shí)別位點(diǎn)的Taqman探針；S2.將樣本核酸經(jīng)酶處理得到單鏈目標(biāo)核酸模板；S3.將S1所得Taqman探針與S2所得單鏈目標(biāo)核酸模板特異性結(jié)合，得到特異性結(jié)合產(chǎn)物，使用切刻酶酶切特異性結(jié)合產(chǎn)物，并實(shí)時(shí)檢測(cè)熒光信號(hào)。本發(fā)明將解旋酶與切刻酶聯(lián)合使用，設(shè)計(jì)帶有切刻酶切割位點(diǎn)的Taqman探針，無需擴(kuò)增出大量核酸產(chǎn)物，只需要產(chǎn)生適量單鏈模板，然后用切刻酶不斷切割與靶位點(diǎn)結(jié)合的探針即可進(jìn)行檢測(cè)，可以避免等溫?cái)U(kuò)增容易造成實(shí)驗(yàn)室污染的缺點(diǎn)，操作簡便、快速，適用于現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。