一種BTV1 VP2蛋白的原核表達(dá)制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201910618587.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110408633A 公開（公告）日 2019-11-05
申請(qǐng)公布號(hào) CN110408633A 申請(qǐng)公布日 2019-11-05
分類號(hào) C12N15/46（2006.01）I; C12N15/70（2006.01）I; C07K14/14（2006.01）I; C07K1/36（2006.01）I; C07K1/34（2006.01）I; C07K1/22（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳玉梅; 王愛萍; 劉運(yùn)超; 劉燕凱; 馮景 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 河南中澤生物工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 鄭州聯(lián)科專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 鄭州大學(xué); 河南中澤生物工程有限公司
地址 450001 河南省鄭州市高新區(qū)科學(xué)大道100號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本申請(qǐng)屬于動(dòng)物疫苗制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用基因工程技術(shù)制備BTV1（藍(lán)舌病1型病毒）VP2蛋白的制備方法專利申請(qǐng)事宜。藍(lán)舌病1型病毒VP2蛋白基因編碼序列VP2U由2886bp堿基組成，具體堿基序列如SEQ ID NO.1所示。具體原核表達(dá)制備BTV1 VP2蛋白時(shí)，包括：PCR擴(kuò)增，酶切、與質(zhì)粒pET28連接構(gòu)建重組質(zhì)粒pET28?VP2U，轉(zhuǎn)化，誘導(dǎo)表達(dá)等步驟。本申請(qǐng)通過對(duì)相關(guān)編碼基因的優(yōu)化，進(jìn)一步借助于原核表達(dá)系統(tǒng)的技術(shù)優(yōu)勢(shì)，為發(fā)酵制備BTV1 VP2蛋白奠定了一定技術(shù)基礎(chǔ)。初步實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，發(fā)酵液上清中的目的蛋白表達(dá)量可達(dá)到58.4μg/ml，可為工業(yè)化生產(chǎn)奠定良好技術(shù)基礎(chǔ)。