一種原核表達(dá)細(xì)胞及其制備方法和應(yīng)用
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010659296.3 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開(kāi)（公告）號(hào) | CN111705032A | 公開(kāi)（公告）日 | 2020-09-25 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN111705032A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-09-25 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N1/21(2006.01)I | 分類(lèi) | 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程; |
| 發(fā)明人 | 高樂(lè);王壹;張昊;栗慧超;于源華;宋禹 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 科赫生物科技（北京）有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京悅和知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 司麗春 |
| 地址 | 100000北京市大興區(qū)生物醫(yī)藥基地春林大街16號(hào)四層 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明實(shí)施例涉及一種原核表達(dá)細(xì)胞及其制備方法和應(yīng)用，該原核表達(dá)細(xì)胞能共表達(dá)肝素酶I HepA’和分子伴侶素CpkA。肝素酶I HepA’的氨基酸序列中，關(guān)鍵是用帶凈正電荷的信號(hào)標(biāo)簽肽取代HepA中前導(dǎo)肽氨基酸序列。改造后的含有一段帶凈正電荷的信號(hào)標(biāo)簽肽的肝素酶I HepA’在原核表達(dá)細(xì)胞中的表達(dá)量大大提高，尤其是存在于上清液中的蛋白量大大提高；同時(shí)由于CpkA的羧基端帶凈負(fù)電荷，其與帶凈正電荷的信號(hào)標(biāo)簽肽產(chǎn)生靜電相互作用，使得CpkA和HepA’結(jié)合力更強(qiáng)，因此CpkA可以更有效地幫助HepA’折疊成正確的構(gòu)象，從而提高其可溶性表達(dá)。?? |
