一種單堿基突變方法及采用的系統(tǒng)

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110782625.8 申請日 -
公開（公告）號 CN113403342A 公開（公告）日 2021-09-17
申請公布號 CN113403342A 申請公布日 2021-09-17
分類號 C12N15/85（2006.01）I;C12N15/113（2010.01）I;C12N15/10（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 包煜賢 申請（專利權(quán)）人 珠海舒桐醫(yī)療科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 代理人 汪青;周敏
地址 519000廣東省珠海市橫琴新區(qū)粵澳合作中醫(yī)藥科技產(chǎn)業(yè)園豆蔻路36號2棟404室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種單堿基突變方法及采用的系統(tǒng)，針對欲突變基因的點突變位點設(shè)計sgRNA并構(gòu)建CRISPR/Cpf1質(zhì)粒；截取欲突變成基因的突變點附近的堿基序列，并在堿基序列中引入無義突變合成donor1；將CRISPR/Cpf1質(zhì)粒和donor1共轉(zhuǎn)染含有欲突變基因的細(xì)胞得到含有無義突變的細(xì)胞；針對含有無義突變的細(xì)胞中的含有無義突變的序列的點突變位點設(shè)計Re?sgRNA并構(gòu)建Re?CRISPR/Cpf1質(zhì)粒；截取欲突變成基因的突變點附近的堿基序列合成donor2；將Re?CRISPR/Cpf1質(zhì)粒和donor2共轉(zhuǎn)染含有無義突變的細(xì)胞得到含有欲突變成基因的細(xì)胞。本發(fā)明能夠達(dá)到無痕修復(fù)的目的。