采用ddPCR方法鑒定PML?RARα融合基因中的Brc3亞型

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710505991.2 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN107523615A 公開（公告）日 2017-12-29
申請(qǐng)公布號(hào) CN107523615A 申請(qǐng)公布日 2017-12-29
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 唐詩瑤;陸軍 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 云健康基因科技（上海）有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 201401 上海市奉賢區(qū)望園路1698弄8幢
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種采用ddPCR方法鑒定PML?RARα融合基因中的Brc3亞型，該ddPCR方法包括提取血液中的RNA并進(jìn)行QC評(píng)估和RNA反轉(zhuǎn)錄cDNA并進(jìn)行QC評(píng)估。本發(fā)明針對(duì)常見的Brc3型，設(shè)計(jì)檢測(cè)fusion探針，引物針對(duì)fusion兩側(cè)序列進(jìn)行擴(kuò)增；將RARΑ基因作為內(nèi)參，設(shè)計(jì)Ref探針，引物僅擴(kuò)增RARΑ基因。本發(fā)明中的ddPCR檢測(cè)方法PML?RARα融合bcr3亞型可達(dá)0.01%的豐度，遠(yuǎn)超RT?PCR的0.1%，重復(fù)性好，無假陽性；在低AF的情況下，建議樣本投入量增加，或重復(fù)多個(gè)平行操作。由于該技術(shù)的高靈敏度，因此可應(yīng)用于疾病的早期確診、動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和防治復(fù)發(fā)。