CRISPR/Cas9系統(tǒng)及其在構(gòu)建α、β和α＆β地中海貧血模型豬細(xì)胞系中的應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> PCT/CN2019/114155 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) WO2021051484A1 公開(kāi)（公告）日 2021-03-25
申請(qǐng)公布號(hào) WO2021051484A1 申請(qǐng)公布日 2021-03-25
分類(lèi)號(hào) C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 NIU, DONG;牛冬;WANG, TAO;汪滔;WANG, DEHUA;王德華;WANG, LEI;王磊;CHENG, RUI;程銳;ZENG, WEIJUN;曾為俊;MA, XIANG;馬翔 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 南京啟真基因工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 HEXIN INTELLECTUAL PROPERTY FIRM;杭州合信專(zhuān)利代理事務(wù)所(普通合伙)
地址 Building 6, No. 17, Huashan Road, Economic Development Zone Of Gaochun District,Nanjing, Jiangsu 211306 CN
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 CRISPR/Cas9系統(tǒng)及其在構(gòu)建α、β和α&β地中海貧血模型豬細(xì)胞系中的應(yīng)用，針對(duì)豬HBA和HBB基因各設(shè)計(jì)了一對(duì)靶點(diǎn)序列，利用該兩對(duì)靶點(diǎn)序列構(gòu)建了三種CRISPR/Cas9系統(tǒng)，每種CRISPR/Cas9系統(tǒng)均包括gRNA載體和Cas9表達(dá)載體；將該三種CRISPR/Cas9系統(tǒng)中的表達(dá)載體按比例分別轉(zhuǎn)入豬成纖維細(xì)胞，篩選得到α、β和α&β地中海貧血模型豬細(xì)胞系。通過(guò)基因編輯技術(shù)在豬原代成纖維細(xì)胞中對(duì)豬HBA、HBB基因分別造成單基因突變及聯(lián)合基因突變，得到HBA、HBB、HBA&HBB基因突變細(xì)胞。