CRISPR/Cas9系統(tǒng)及其在構建α、β和α&β地中海貧血模型豬細胞系中的應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910890978.2 申請日 -
公開（公告）號 CN112538497A 公開（公告）日 2021-03-23
申請公布號 CN112538497A 申請公布日 2021-03-23
分類號 C12N15/113(2010.01)I;C12N9/22(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N15/90(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 牛冬;汪滔;王德華;王磊;程銳;曾為俊;馬翔 申請（專利權）人 南京啟真基因工程有限公司
代理機構 杭州君度專利代理事務所（特殊普通合伙） 代理人 解明鎧
地址 211306江蘇省南京市高淳區(qū)經濟開發(fā)區(qū)花山路17號6幢
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了CRISPR/Cas9系統(tǒng)及其在構建α、β和α&β地中海貧血模型豬細胞系中的應用，針對豬HBA和HBB基因各設計了一對靶點序列，利用該兩對靶點序列構建了三種CRISPR/Cas9系統(tǒng)，每種CRISPR/Cas9系統(tǒng)均包括gRNA載體和Cas9表達載體；將該三種CRISPR/Cas9系統(tǒng)中的表達載體按比例分別轉入豬成纖維細胞，篩選得到α、β和α&β地中海貧血模型豬細胞系。本發(fā)明通過基因編輯技術在豬原代成纖維細胞中對豬HBA、HBB基因分別造成單基因突變及聯(lián)合基因突變，得到HBA、HBB、HBA&HBB基因突變細胞。??