一種一步法合成L-肌肽的方法及截短的L-肌肽合成酶

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910041416.0 申請日 -
公開(公告)號 CN109851658B 公開(公告)日 2019-06-07
申請公布號 CN109851658B 申請公布日 2019-06-07
分類號 C07K5/062(2006.01)I; 分類 有機化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 朱益波;王明崇;陳穎;武國寒;高桂蘭;趙成相 申請(專利權(quán))人 蘇州百因諾生物科技有限公司
代理機構(gòu) 常州佰業(yè)騰飛專利代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 滕詣迪
地址 215400 江蘇省蘇州市太倉市沙溪鎮(zhèn)昭溪路98號1幢、2幢
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種一步法合成L?肌肽的方法及截短的L?肌肽合成酶,該方法以β?丙氨酸、L?組氨酸、ATP和聚磷酸鹽為原料,MgCl2為激活劑,加入L?肌肽合成酶和聚磷酸鹽激酶,在pH 6.5?8.5,30?45℃溫度條件下通過酶促反應(yīng)偶聯(lián)催化合成肌肽;本發(fā)明利用大腸桿菌分別表達(dá)截短的L?肌肽合成酶(其氨基酸序列如SEQ ID No.3所示)和聚磷酸鹽激酶,經(jīng)純化后混合形成雙酶偶聯(lián)體系,截短表達(dá)的L?肌肽合成酶催化β?丙氨酸和L?組氨酸合成L?肌肽,同時伴隨著ATP去磷酸化形成ADP,聚磷酸鹽激酶則催化聚磷酸鹽轉(zhuǎn)磷酸基團(tuán)給ADP形成ATP,從而實現(xiàn)ATP的循環(huán)再生;利用雙酶偶聯(lián)體系,在合適的反應(yīng)條件下反應(yīng)得到肌肽;本發(fā)明的方法具有原料價格低廉、酶轉(zhuǎn)化時間短、操作簡便以及生產(chǎn)成本低等優(yōu)點。??