直接重編程小鼠肝細(xì)胞為胰島β細(xì)胞的方法及應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201510400183.0 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN105002142A 公開(kāi)（公告）日 2015-10-28
申請(qǐng)公布號(hào) CN105002142A 申請(qǐng)公布日 2015-10-28
分類(lèi)號(hào) C12N5/10(2006.01)I;C12N5/071(2010.01)I;C07K14/62(2006.01)I;A61K38/28(2006.01)I;A61K35/39(2015.01)I;A61P3/10(2006.01)I 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李富榮;齊暉;鄧春艷;張?zhí)锾?/td> 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 深圳市諾亞起航生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 關(guān)暢;白艷
地址 518020 廣東省深圳市東門(mén)北路1017號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了直接重編程小鼠肝細(xì)胞為胰島β細(xì)胞的方法及應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種使肝細(xì)胞重編程為胰島β細(xì)胞的方法，包括如下步驟：將Pdx1蛋白編碼基因、Pax4蛋白編碼基因和Neurod1蛋白編碼基因轉(zhuǎn)染離體肝臟細(xì)胞，得到胰島β細(xì)胞；本發(fā)明的優(yōu)勢(shì)在于，第一，采用非病毒EntransterTM-D轉(zhuǎn)染試劑，不但具有較高的轉(zhuǎn)染效率，同時(shí)大大提高了直接重編程過(guò)程中轉(zhuǎn)染的安全性。第二，根據(jù)文獻(xiàn)的報(bào)道，篩選出適用于直接重編程為胰島β細(xì)胞新的最佳轉(zhuǎn)染組合Pdx1、Pax4、Neurod1。第三，根據(jù)各個(gè)轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮作用的先后順序，篩選出最佳轉(zhuǎn)染時(shí)段24h，從而提高了直接重編程為胰島細(xì)胞的成熟度問(wèn)題，本研究中重編程效率達(dá)23％。