直接重編程小鼠肝細胞為胰島β細胞的方法及應用
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN201510400183.0 | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN105002142B | 公開(公告)日 | 2019-04-05 |
申請公布號 | CN105002142B | 申請公布日 | 2019-04-05 |
分類號 | C12N5/10(2006.01)I; C12N5/071(2010.01)I; C07K14/62(2006.01)I; A61K38/28(2006.01)I; A61K35/39(2015.01)I; A61P3/10(2006.01)I | 分類 | 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 李富榮; 齊暉; 鄧春艷; 張?zhí)锾?/td> | 申請(專利權)人 | 深圳市諾亞起航生物科技有限公司 |
代理機構 | 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 | 代理人 | 關暢;白艷 |
地址 | 518020 廣東省深圳市東門北路1017號 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了直接重編程小鼠肝細胞為胰島β細胞的方法及應用。本發(fā)明提供了一種使肝細胞重編程為胰島β細胞的方法,包括如下步驟:將Pdx1蛋白編碼基因、Pax4蛋白編碼基因和Neurod1蛋白編碼基因轉染離體肝臟細胞,得到胰島β細胞;本發(fā)明的優(yōu)勢在于,第一,采用非病毒EntransterTM?D轉染試劑,不但具有較高的轉染效率,同時大大提高了直接重編程過程中轉染的安全性。第二,根據(jù)文獻的報道,篩選出適用于直接重編程為胰島β細胞新的最佳轉染組合Pdx1、Pax4、Neurod1。第三,根據(jù)各個轉錄因子發(fā)揮作用的先后順序,篩選出最佳轉染時段24h,從而提高了直接重編程為胰島細胞的成熟度問題,本研究中重編程效率達23%。 |
