直接重編程小鼠肝細胞為胰島β細胞的方法及應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510400183.0 申請日 -
公開(公告)號 CN105002142B 公開(公告)日 2019-04-05
申請公布號 CN105002142B 申請公布日 2019-04-05
分類號 C12N5/10(2006.01)I; C12N5/071(2010.01)I; C07K14/62(2006.01)I; A61K38/28(2006.01)I; A61K35/39(2015.01)I; A61P3/10(2006.01)I 分類 生物化學;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學;酶學;突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李富榮; 齊暉; 鄧春艷; 張?zhí)锾?/td> 申請(專利權)人 深圳市諾亞起航生物科技有限公司
代理機構 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 關暢;白艷
地址 518020 廣東省深圳市東門北路1017號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了直接重編程小鼠肝細胞為胰島β細胞的方法及應用。本發(fā)明提供了一種使肝細胞重編程為胰島β細胞的方法,包括如下步驟:將Pdx1蛋白編碼基因、Pax4蛋白編碼基因和Neurod1蛋白編碼基因轉染離體肝臟細胞,得到胰島β細胞;本發(fā)明的優(yōu)勢在于,第一,采用非病毒EntransterTM?D轉染試劑,不但具有較高的轉染效率,同時大大提高了直接重編程過程中轉染的安全性。第二,根據(jù)文獻的報道,篩選出適用于直接重編程為胰島β細胞新的最佳轉染組合Pdx1、Pax4、Neurod1。第三,根據(jù)各個轉錄因子發(fā)揮作用的先后順序,篩選出最佳轉染時段24h,從而提高了直接重編程為胰島細胞的成熟度問題,本研究中重編程效率達23%。