直接重編程小鼠肝細胞為胰島β細胞的方法及應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201510400183.0 申請日 -
公開（公告）號 CN105002142B 公開（公告）日 2019-04-05
申請公布號 CN105002142B 申請公布日 2019-04-05
分類號 C12N5/10（2006.01）I; C12N5/071（2010.01）I; C07K14/62（2006.01）I; A61K38/28（2006.01）I; A61K35/39（2015.01）I; A61P3/10（2006.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李富榮; 齊暉; 鄧春艷; 張?zhí)锾?/td> 申請（專利權）人 深圳市諾亞起航生物科技有限公司
代理機構 北京紀凱知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 關暢;白艷
地址 518020 廣東省深圳市東門北路1017號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了直接重編程小鼠肝細胞為胰島β細胞的方法及應用。本發(fā)明提供了一種使肝細胞重編程為胰島β細胞的方法，包括如下步驟：將Pdx1蛋白編碼基因、Pax4蛋白編碼基因和Neurod1蛋白編碼基因轉染離體肝臟細胞，得到胰島β細胞；本發(fā)明的優(yōu)勢在于，第一，采用非病毒EntransterTM?D轉染試劑，不但具有較高的轉染效率，同時大大提高了直接重編程過程中轉染的安全性。第二，根據(jù)文獻的報道，篩選出適用于直接重編程為胰島β細胞新的最佳轉染組合Pdx1、Pax4、Neurod1。第三，根據(jù)各個轉錄因子發(fā)揮作用的先后順序，篩選出最佳轉染時段24h，從而提高了直接重編程為胰島細胞的成熟度問題，本研究中重編程效率達23％。