一種利用原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)純化多肽的方法
基本信息
申請?zhí)?/td> | CN202010786828.X | 申請日 | - |
公開(公告)號 | CN112029788A | 公開(公告)日 | 2020-12-04 |
申請公布號 | CN112029788A | 申請公布日 | 2020-12-04 |
分類號 | C12N15/70;C12P21/06;C07K7/06;C12R1/19 | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 郭偉 | 申請(專利權(quán))人 | 江蘇亨瑞生物醫(yī)藥科技有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 | 代理人 | 黃美娟;李世玉 |
地址 | 225306 江蘇省泰州市海陵區(qū)東方溫莎小鎮(zhèn)19棟301 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明公開了一種利用原核表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)純化多肽的方法,所述方法為:將多肽單元的C端加上腸激酶酶切位點,N端加上組氨酸標(biāo)簽,獲得重組多肽單元;然后從N端到C端依次將若干個重組多肽單元串聯(lián),獲得重組蛋白的氨基酸序列;將重組蛋白的編碼基因?qū)氪竽c桿菌,構(gòu)建重組大腸桿菌;重組大腸桿菌誘導(dǎo)表達(dá)后,濕菌體用緩沖液重懸破碎后,提取重組蛋白;重組蛋白采用腸激酶處理后,獲得多個多肽單元。本發(fā)明通過在要表達(dá)的短肽之間加上腸激酶的酶切位點,利用腸激酶處理最后可以保證得到大小和序列統(tǒng)一的目的短肽,有效的克服了無法利用原核系統(tǒng)表達(dá)多肽的難題。 |
