一種用于檢測酶加dA尾效率的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910041144.4 申請日 -
公開（公告）號 CN109680048A 公開（公告）日 2019-04-26
申請公布號 CN109680048A 申請公布日 2019-04-26
分類號 C12Q1/686（2018.01）I; C12Q1/6876（2018.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 鄭賢杰; 秦雪梅; 朱樂敏; 曹振; 宋東亮 申請（專利權）人 上海翊圣生物科技有限公司
代理機構 上海精晟知識產權代理有限公司 代理人 馮子玲
地址 200120 上海市浦東新區(qū)天雄路166弄1號樓3層301A
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種用于檢測酶加dA尾效率的方法，包括：步驟一、合成5’末端分別為A、T、G、C的四組引物；步驟二、采用原核生物或者真核生物的全基因組作為模板，步驟三、對模板進行引物擴增，步驟四、制備相應的質粒，步驟五、得到模板質粒，步驟六、以模板質粒為模板，分別以四組引物作為引物，采用高保真酶進行擴增；步驟七、純化回收步驟六的產物；步驟八、以步驟七中的產物作為模板，采用待檢測的各個酶分別進行加dA尾或者PCR；步驟九、回收加dA尾的產物；步驟十、采用毛細管電泳檢測各個待測酶的加dA尾的產物，對比評價各個待測酶的加dA尾效果。本發(fā)明能夠直觀分析待選酶和體系的性能，提高篩選的準確性和效率。