高效表達抗EGFR單克隆抗體細胞的篩選培養(yǎng)方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011192793.3 申請日 -
公開(公告)號 CN112391350A 公開(公告)日 2021-02-23
申請公布號 CN112391350A 申請公布日 2021-02-23
分類號 C12N5/10(2006.01)I; 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 于紅陽;申陽陽;王紅麗;胡桂珍;楊仲璠;徐明波 申請(專利權(quán))人 北京雙鷺生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 北京知呱呱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 孫志一
地址 100000北京市海淀區(qū)西三環(huán)北路100號金玉大廈1103-1105室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明實施例公開了一種高效表達抗EGFR單克隆抗體細胞的篩選培養(yǎng)方法,所述方法包括:將重組抗EGFR單克隆抗體的種子細胞復(fù)蘇,在Actipro基礎(chǔ)培養(yǎng)基中放大培養(yǎng)后得到種子細胞培養(yǎng)懸液,將所述種子細胞培養(yǎng)懸液接種,發(fā)酵培養(yǎng),定期流加補料培養(yǎng)基和葡萄糖溶液,培養(yǎng)至細胞活率低于80%,收獲發(fā)酵培養(yǎng)液,得到所述高效表達抗EGFR單克隆抗體細胞培養(yǎng)液。本發(fā)明方法篩選高效分泌表達抗EGFR抗體的敲除巖藻糖轉(zhuǎn)移酶基因的CHO細胞系,使所表達的蛋白無巖藻糖修飾,以增強重組抗EGFR單抗的ADCC作用,增強其抗腫瘤效果,擴大適用人群。??