限制性凝血酶的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610107662.8 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN105624134B 公開（公告）日 2019-05-21
申請(qǐng)公布號(hào) CN105624134B 申請(qǐng)公布日 2019-05-21
分類號(hào) C12N9/74（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃宏寶; 黃發(fā)燦; 鄭登忠; 郭曉乾; 章麗麗 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 福建三明農(nóng)村商業(yè)銀行股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 福州市博深專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 福建華燦制藥有限公司
地址 365000 福建省三明市三元區(qū)荊東工業(yè)園32號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種純度高、比活高的限制性凝血酶的制備方法，利用陰離子交換層析介質(zhì)從豬血漿中吸附凝血酶原，對(duì)陰離子層析柱進(jìn)行洗脫，活化凝血酶原，得凝血酶粗溶液，經(jīng)超濾濃縮，得凝血酶濃縮液，再用陽(yáng)離子交換層析介質(zhì)吸附凝血酶，對(duì)陽(yáng)離子層析柱進(jìn)行洗脫，得凝血酶溶液，經(jīng)超濾脫鹽濃縮，最后凍干得限制性凝血酶成品。本發(fā)明的有益效果在于：利用豬血制備限制性凝血酶，有利于充分利用豬血資源，減少環(huán)境污染；在常溫常壓下即可制備限制性凝血酶，減少設(shè)備投資；制備得到的限制性凝血酶純度高，可達(dá)到電泳純，可用于酶切GST融合蛋白；操作簡(jiǎn)單，僅需離心、上樣層析、超濾和凍干等幾個(gè)步驟，容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。